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产品概述

碘化丙锭( Propidium Iodide , PI)可以与细胞内DNA和RNA结合,采用RNA抑制剂将RNA消化后,通过流式细胞术检测到的与DNA结合的PI的荧光强度直接反映了细胞内DNA含量的多少。由于细胞周期各时相的DNA含量不同,通常正常细胞的G1/G0期具有二倍体细胞的DNA含量(2N),而G2/M期具有四倍体细胞的DNA含量(4N), 而S期的DNA含量介于二倍体和四倍体之间。因此,通过流式细胞术PI染色法对细胞内DNA含量进行检测时,可以将细胞周期各时相区分为G1/G0期,S期和G2/M期,并可通过特殊软件计算各时相的百分率。

PI 不能通过细胞膜完整的细胞(如活细胞和早期凋亡细胞),在标本制备时,必须先用乙醇或其他破膜剂增强细胞膜的通透性,才能使PI进入细胞内与细胞内的核酸结合。乙醇通常是终浓度为70%的冷乙醇。

本试剂盒可用于贴壁细胞或悬浮细胞的细胞周期检测。

包装信息

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操作流程

1. 细胞样品的收集。用胰酶消化细胞,将消化好的细胞收集至离心管内,1000xg,5min,沉淀细胞。

2. PBS重悬细胞并调整细胞浓度为1×106 /ml,1000xg,5min,沉淀细胞。

3. 加入1ml 70%的冷乙醇固定2h至过夜,染色前用预冷的PBS洗去固定液。

4. 加入100μl RNase A,37℃水浴30min。

5. 加入500μl Propidium Iodide染色液混匀,4℃避光30min。

6. 用流式仪检测分析,记录激发波长488nm处红色荧光。

产品图片:

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