产品概述

全蛋白提取试剂盒（Whole Cell Lysis Assay）可用于从哺乳动物组织和细胞中提取全蛋白，用含有蛋白酶抑制剂的裂解缓冲液Lysis Buffer匀浆裂解组织或细胞，提取过程简便高效。获得的全蛋白可用于Western Blot、IP等后续研究，但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究。

包装信息

操作流程

Ⅰ 细胞蛋白提取
1. 贴壁细胞：用预冷的1xPBS洗2-3次， 以洗去培养液。
2. 悬浮细胞：将细胞及培养液移至预冷的离心管中，离心10min（1000rpm）后，弃上清。
3. 将预冷的Lysis Buffer按每1ml加入10μl PMSF的比例混匀备用，Lysis Buffer加入量参考下表。

4. 用细胞刮（沉淀振荡）充分破碎细胞，将其倒入离心管中超声；如果没有超声仪，冰上裂解30 min。

5.12000rpm，4℃离心 , 10min，上清为全蛋白提取物，可进行蛋白定量。

6. 分装保存于-70℃，避免反复冻融。

Ⅱ 组织蛋白的提取

1.取新鲜组织 , 用预冷的1xPBS洗2-3次。

2.将组织剪成小块 , 放入预冷的研钵中 , 倒入液氮充分研碎。

3.将预冷的Lysis Buffer 按每1ml 加入10μl PMSF的比例混匀备用。

4.每100mg组织应加入0.5-1mlLysis Buffer ，充分研磨。如果粘度过大则再需加入一定量Lysis Buffer再次研磨，之后进行超声。

5.12000rpm，4℃离心 , 10min，上清为全蛋白提取物，可进行蛋白定量。

6.分装保存于-70℃，避免反复冻融。