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产品概述

2×PCR Master Mix With Indicator中 含 有 2×Taq DNA Polymerase , 2×PCR Buffer , 2×dNTP以及 Loading Buffer , 只需加入适量引物、模板和水即可进行PCR扩增。大大简化了PCR操作,使操作更加快捷,也减少了PCR操作过程中可能导致的污染,使PCR的重复性更好。利用2×PCR Master Mix  With Indicator可以进行各种常规的PCR扩增,但不适合用于荧光定量PCR。 本试剂盒用于50μl的PCR反应体系,足够用于160个反应,用于20μl的PCR反应体系,足够用于400个反应。

包装信息

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操作流程

1. PCR反应体系设置 :
a. 溶解并混匀PCR反应所需的各种溶液,将2×PCR Master Mix With Indicator 置于冰浴上或冰盒内。

b. 参考下表在冰浴上设置PCR反应:

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c. 用移液器轻轻吹打或轻微Vortex混匀,室温离心数秒,使液体积聚于管底。
d. 将设置好的PCR反应管置于PCR仪上,开始PCR反应。
2. PCR反应参数的设置可以参考如下示例:
STEP1(起始变性):94℃ 3min
STEP2(变性):94℃ 30s
STEP3(退火):55℃ 30s
STEP4(延伸):72℃ 1min
STEP5(循环):Go To STEP2 for 30 cycles
STEP6(最终延伸):72℃ 10min
STEP7(临时保存):4℃ forever
a. PCR反应的设置需根据模板、引物、PCR产物的长度和GC含量等条件的不同设定不同的PCR反应条件包括温度、时间和循环数等。
b. STEP4(延伸)的时间设置需根据PCR产物的长度进行设置,通常每kb产物的延伸时间为1min。例如PCR产物的长度为1kb,则延伸时间可以设置为1min,PCR产物的长度为2kb,则延伸时间可以设置为2min,以此类推。
3. 反应结束后,取出反应液10μl进行琼脂糖凝胶电泳,确认PCR反应产物。如果此PCR反应产物需用于以后实验,应将PCR产物冻存保存。

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