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产品概述

RT-PCR反应就是从RNA反转录至cDNA,然后通过PCR反应扩增至cDNA的过程。本试剂盒适用于各种动、植物、病毒RNA反转录产生cDNA第一链。包含了进行cDNA第一链合成所需的各种试剂 , RT反应体系为20μL。

本产品可以完成长度为8kb及以下基因的反转录,反转录的最大长度可以超过10kb。如果模板RNA的GC含量较高或者有比较严重的二级结构,可以65ºC孵育5min,随后立即置于冰上冷却,以打开RNA中一些比较稳定的二级结构。 后续可以用于 PCR、real-time PCR、cDNA 的第二链合成以及cDNA 文库的构建等。

包装信息

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操作流程

1. 使用前将每个组份轻轻混匀,然后2000rpm离心20s。

2. 取灭过菌且无核酸酶的0.2ml PCR管,依次加入以下试剂:

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70°C保温5min , 然后冰浴5min。
3. 往步骤2中的0.2ml PCR管依次加入下列组份:

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4. 轻轻混匀后,2000rpm离心20s , 25°C保温10min。
5. 先在42°C保温50min , 然后80°C保温10min。
6. 上述产物可立即进行下一步的PCR反应或-20°C保存。

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