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产品概述

本试剂盒适用于纯化 100bp-10kb DNA,长至30个碱基的引物均可被完全去除。本试剂盒采用了一种新型的离子交换柱。在特定条件下,使DNA能在离心过柱的瞬间,结合到DNA纯化柱上,在一定条件下又能将DNA充分洗脱, 从而实现DNA的快速纯化。无需酚氯仿抽提,无需酒精沉淀,12个样品只需不足15min即可完成。 每个DNA纯化柱可以结合的DNA量的上限约为 15μg。接近 100bp或 10kb的DNA片断回收效率要略低一些,大于 10kb 的DNA回收效率迅速下降。另外如果样品中DNA含量特别低也会导致回收效率下降。 每个试剂盒足够纯化 50个平均体积不超过 400μl 的DNA样品。

包装信息

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操作流程

1. 加入3倍体积的溶液 I,混匀。例如:如果DNA样品体积为100μl,则加300μl 溶液 I。如果混合后体积较大,可以把部分样品加入到纯化柱内,经离心处理后,再加入剩余的样品继续处理。矿物油对于本试剂盒没有干扰。
2. 加入到DNA纯化柱内,室温放置2min。
3. 12,000rpm离心1min,倒弃收集管内的液体。
4. 在DNA纯化柱内加入600μl 溶液Ⅱ。
5. 12,000rpm 离心1min,洗去杂质。倒弃收集管内的液体。
6. 再加入600μl 溶液Ⅱ,12,000 离心1min,进一步洗去杂质。倒弃收集管内的液体。
7. 12,000rpm 离心2min,除去残留液体并让残留的乙醇充分挥发。
8. 将DNA纯化柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量的溶液Ⅲ(如果回收的目的片段>4kb,则溶液Ⅲ应置于65-70℃水浴预热),室温放置2min。12,000rpm离心2min收集DNA溶液。注意:溶液Ⅲ的体积不应少于30 μl,体积过少会影响回收的效率。溶液Ⅲ的pH值对于洗脱效率有较大影响。若后续做测序,需使用ddH2O做洗脱液,并保证其pH值在7.0-8.5范围内,且DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。为了提高DNA的回收量,可将离心得到的溶液重新加回离心吸附柱中,室温放置2min,12,000rpm离心2min,将DNA溶液收集到离心管中。

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