好评率
100%
    • 单位及专业:新乡市中心医院
      科室/实验室:中心实验室
      2025-04-13
    • 使用结果如何:
    • 简述实验条件:1)原位装载探针(仅适用于贴壁细胞) ① 细胞准备:检测前一天进行细胞铺板,确保检测时细胞数量小于5×10^5/mL;② 药物诱导:去除细胞培养液,加入无血清培养基稀释的药物处理,于37℃细胞培养箱内避光孵育,实际诱导时间由药物特性和细胞类型决定;③(可选)阳性对照:先用无血清培养基等稀释阳性对照(abs580232,Rosup, 100mM)到常用工作浓度100μM,加入细胞,37℃避光孵育30min-4h,以提高活性氧水平,不同细胞类型存在差异。例如,HeLa细胞需孵育30-60min,MRC5人胚胎成纤维细胞则需孵育90min;④ ROS探针准备:探针装载前按照1:1000用无血清培养液稀释DCFH-DA,使其终浓度为10μM;⑤ ROS探针装载:吸除处理药物,加入适当体积稀释好的DCFH-DA工作液。加入的体积需充分盖住细胞。例如,6孔板通常不少于1mL,对于96孔板通常不少于100μL。37℃细胞培养箱内避光孵育30min;⑥ 细胞清洗:用无血清培养液洗涤细胞1-2次,以充分去除未进入细胞内的DCFH-DA。
  • Ombra
    • 单位及专业:浙江农林大学畜牧
      科室/实验室:牛冬课题组
      2025-02-28
    • 使用结果如何:良好
    • 简述实验条件:使用RAW细胞,LPS处理后使用ROS试剂盒,观察到明显的绿色荧光
  • 徐徐
    • 单位及专业:新乡市中心医院
      科室/实验室:中心实验室
      2025-01-20
    • 使用结果如何:
    • 简述实验条件:1、准备细胞:将目的细胞均匀铺至六孔板中,实验组和对照组分别做相应处理,并预设空白管(即不装载探针)。至细胞密度达到80%-95%。2、清洗:用PBS将六孔板中细胞分别清洗1-2次,并弃去PBS。3、消化:用胰酶将六孔板中细胞消下来,移至1.5mlEP管中,并做好标记。4、离心:1200r,常温,离心5min。5、探针配制:按照2μl DCFH-DA原液:3ml无血清培养基配制,上下颠倒混匀(注意避光)。6、加入探针:弃去4中培养基,空白管加入1ml无血清培养基,其余均加入1ml配制好的探针液,并重悬细胞(注意避光)。7、孵育:37°C避光孵育20min。8、离心:1200r,常温,离心5min,弃去上清。9、清洗:用1ml冷PBS清洗,1200r,常温,离心5min,弃去上清,重复2次(注意避光)。10、上机:将细胞用500μl冷PBS重悬,并移至流式管,上机。注意事项:
  • 是地雷啊
    • 单位及专业:滨州医学院检验
      科室/实验室:滨医附院医学检验实验中心
      2025-01-16
    • 使用结果如何:良好
    • 简述实验条件:1接种细胞到96孔板中,培养箱中培养过夜 2待细胞密度达到60-70%,转染/加药处理细胞,处理48H(根据个人实验而定)3稀释探针:按照1:500用无血清培养液稀释 DCFH-DA,使终浓度为10 μ mol/L4装载探针:去除原细胞培养液,加入适当体积稀释好的DCFH-DA(避光) 加入的量可以覆盖住细胞层即可(96孔板50ul,6孔板1ml) 537℃细胞培养箱内孵育 20min 6用无血清细胞培养液洗涤细胞三次,以充分去除未进入细胞内的DCFH-DA 7清洗完成后,加入50ulPBS进行后续检测 8多功能酶标仪检测(使用488nm激发波长,525nm 发射波长) 或者荧光显微镜拍照
    • 单位及专业:新乡市中心医院 重症医学科
      科室/实验室:新乡市中心医院 实验室
      2024-12-11
    • 使用结果如何:
    • 简述实验条件:两种液体各1ml,互相混匀后,完全浸没NC膜,然后上机曝光。
  • 挽袖
    • 单位及专业:山东第二医科大学病理生理学
      科室/实验室:科技楼c座401
      2024-11-25
    • 使用结果如何:效果较好
    • 简述实验条件:细胞铺板6孔板,贴壁后加药,然后将ros试剂盒稀释为10um浓度加入6孔板30min,消化收集去流式上机
  • 甲钴胺
    • 单位及专业:山东大学
      科室/实验室:基础医学院
      2024-09-15
    • 使用结果如何:良好
    • 简述实验条件:提前装载 dcfhda 探针,根据种板不同加入不同的使用液,37°C 孵箱孵育 30min,尽快去荧光显微镜拍摄
  • 胡远龙
    • 单位及专业:广州医科大学中西医结合临床
      科室/实验室:中西医结合研究所
      2024-08-15
    • 使用结果如何:效果不错,荧光明显,符合实验预期
    • 简述实验条件:已造模的中性粒细胞预先用DCFH-DA标记,并用PBS稀释至1:500,孵育20min。洗去细胞外DCFH-DA染料后,将细胞重新悬浮于新鲜的RPMI培养基中(8×10^4个细胞),并接种到96孔板中。荧光显微镜下观察荧光强度。
  • 天道酬勤
    • 单位及专业:四川农业大学
      科室/实验室:动物繁殖
      2024-06-26
    • 使用结果如何:正常使用
    • 简述实验条件:双氧水诱导的氧化应激,使用后能明显观察到ROS产生
    • 单位及专业:武汉大学
      科室/实验室:武汉大学第一临床学院
      2024-05-01
    • 使用结果如何:不佳
    • 简述实验条件:将20ul的ROS检测液加入到10ml完全培养基中,配成1:500的浓度,然后加到种好板的ht22细胞中,避光孵育半小时,后放置在倒置荧光显微镜下观察,无任何荧光发现,阳性对照也无任何荧光
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