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RIPA裂解液(强)
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使用报告(9)
徐徐
单位及专业:
新乡市中心医院
科室/实验室:
中心实验室
2025-01-20
使用结果如何:
好
简述实验条件:
准备:将细胞培养至所需状态,弃去培养基。处理:加入预冷的RIPA裂解液,轻轻吹打细胞,确保细胞完全悬浮。转移:将样品转移至冰浴上的离心管中,冰上孵育30分钟。裂解:使用超声波破碎仪或通过反复冻融法进一步裂解细胞。离心:12,000g离心10分钟,收集上清液作为蛋白质样品。
博士
单位及专业:
新乡市中心医院
科室/实验室:
新乡市中心医院
2024-12-18
使用结果如何:
好
简述实验条件:
1.组织蛋白的提取与浓度测量(在冰上操作): (1)准备组织样本,本过程全程在在冰上操作,将组织样本从动物体内取出,称取 40mg 小鼠肺组织,立即放入预冷的PBS(pH 7.4,4°C)中,清洗组织样本2-3 次,以去除血渍和杂质,然后将其放在滤纸上,吸除多余的 PBS 后放入对应的匀浆管中,使用消毒的手术剪将组织剪成约1-2mm³的小块。将剪好的组织小块放入预冷的2mL离心管中。 (2)按照每100mg组织加入1mL RIPA裂解液的比例加入裂解液,40mg组织中加入 400μl 裂解液(PMSF:RIRA 裂解液=1:99),使用电动匀浆器充分匀浆。 匀浆完成后,将匀浆管置于冰上静置30分钟,以充分裂解组织(或使用超声波处理10分钟)。 (3)样品放入低温离心机中,4℃,12000g 离心 10min,取上清液,避开上层油脂和底层杂质(上清液立刻转移入新的离心管中保存待用)。 (4)使BCA方法检测蛋白浓度,步骤与提取全蛋白相同。 (5)将提取的蛋白加入5×loading缓冲液,然后在95摄氏度下煮沸10分钟,并将煮好的蛋白放入-80℃冰箱保存。
MM
单位及专业:
兽医
科室/实验室:
环境兽医学
2024-12-13
使用结果如何:
很好
简述实验条件:
提取的睾丸组织蛋白,效果不错,裂解的很充分,预混裂解液后加到组织,加钢珠,匀浆了7min,冰上静置半小时,离心取上清
刘哈哈
单位及专业:
南京鼓楼
科室/实验室:
药学
2024-10-21
使用结果如何:
很好
简述实验条件:
细胞提提取后,裂解液充分裂解30min冰上后提取蛋白,蛋白定量后进行免疫蛋白印记
李丹
单位及专业:
中国药科大学
科室/实验室:
李运曼课题组
2024-01-29
使用结果如何:
好用,比膜蛋白抽提试剂盒好用
简述实验条件:
抽提小鼠脑组织的内皮细胞膜蛋白,用研磨器研磨后超生-20度过夜离心
徐大平
单位及专业:
重庆医科大学/药理学
科室/实验室:
彭咏波课题组
2023-10-26
使用结果如何:
很不错
简述实验条件:
细胞清洗,加入一定比例裂解液,冰上裂解15min,细胞刮收集蛋白裂解物,12000rpm,离心20min,收集上清
牛
单位及专业:
扬州大学兽医学院
科室/实验室:
繁殖育种实验室
2023-10-22
使用结果如何:
条带清晰
简述实验条件:
10%分离胶,80v 30min,120v 70 min.转膜200mA 60 min,抗体1:1000稀释,过夜4度孵育,二抗1:10000,室温孵育2h
益思柯
单位及专业:
益思柯生物
科室/实验室:
WB平台
2022-03-02
使用结果如何:
质量可以,裂解充分,内参出的也很好。
简述实验条件:
冰上化冻RIPA 裂解液,加入PMSF,蛋白酶抑制剂,磷酸化蛋白酶抑制剂。用细胞刮刀将细胞刮下来,400g离心5min,收集细胞沉淀,用PBS洗涤一次,再离心,弃上清,加入RIPA裂解液,吹打细胞,冰上裂解15min,12000个、4度离心15min ,上清转移至新的离心管中,加入1/4体积5xloading buffer ,煮沸5min 上样。
123
单位及专业:
中国药科大学
科室/实验室:
药理实验室
2021-11-24
使用结果如何:
好
简述实验条件:
用于IP实验,每瓶贴壁细胞加入500微升的裂解液,置于冰上裂解15min,12000r高速离心5min,收集上清用于后续实验。