1. 严重脂血、黄疸或溶血血清可能会引起测定管吸光度增加,因此,检测此类标本时,应该做血清标本对照管。
2. 一般血清标本内源性丙酮酸很少,血清对照管吸光度值接近试剂空白管(以0.1ml蒸馏水代替血清,其他和对照管同样操作)。所以,成批标本测定时,一般不需要每一标本都作本身血清对照管,以试剂空白管代替即可,但对超过正常的血清标本应进行复查,复查时,每份标本应作对照管。
3. 当血清标本酶活力超过150卡门氏单位时,应将血清用生理盐水稀释5倍或10倍后进行测定。
4. 加入2,4-二硝基苯肼溶液后,应充分混匀,使反应完全,加氢氧化钠溶液方法要一致,不同方法会导致吸光度读数的差异。
5. 比色法中常用的有赖氏法及金氏法。赖氏法标准曲线所定单位数,使用实验方法和卡门氏分光光度法作对比测定求得的。以卡门氏单位报告结果,比较准确。
卡门氏单位定义:1ml血清,反应液总容量3ml,340nm波长,1cm光径,25℃,1min内所生成的丙酮酸,使NADH氧化成NAD+ 而引起吸光度每下降0.001为一个卡门氏单位。
6. 血清中AST/GOT在室温(25℃)可保存2天,在0~4℃可保存一周,在-25℃可保存一个月。
7. 1卡门氏单位=0.482IU/L,25℃