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100%
  • 张康康
    • 单位及专业：东北农业大学，动物医院学院
      科室/实验室：基础兽医学，药理
      2026-04-21
    • 使用结果如何：很好很好
    • 简述实验条件：- 全程冰上操作、4℃预冷离心机、所有试剂冰浴 ​ - 提取Buffer临用前加：蛋白酶抑制剂（1:100）+ 磷酸酶抑制剂（1:100）（必加，防降解） ​ - 细胞：≥1×10⁷个；组织：50–100mg（去脂肪/结缔，剪碎） ???? 细胞提取（最简6步，无匀浆、无复杂操作） 1. 收集细胞：4℃、500×g 离心5min，弃上清；预冷PBS洗2次，吸干 ​ 2. 温和裂解：加胞质提取Buffer A（500μL/1×10⁷细胞），冰上孵育10min，轻柔吹打10次（不涡旋、不超声），破膜不碎线粒体 ​ 3. 去碎片：4℃、1000×g 离心10min → 上清=胞质蛋白；沉淀含线粒体+核 ​ 4. 富集线粒体：取上清（弃沉淀），4℃、10000×g 离心15min → 弃上清，沉淀=粗提线粒体（关键：不用超速） ​ 5. 洗线粒体：加500μL预冷洗涤液，重悬沉淀；4℃、10000×g 离心10min → 弃上清，重复1次（去胞质污染） ​ 6. 裂解提蛋白：沉淀加线粒体裂解Buffer（50–100μL），冰上裂解20min；4℃、12000×g 离心10min → 上清=线粒体蛋白，-80℃保存
  • 香香
    • 单位及专业：锦州医科大学临床检验诊断学
      科室/实验室：检验科
      2025-06-25
    • 使用结果如何：结果挺好
    • 简述实验条件：完全按照说明书操作，提出线粒体沉淀后我用pbs再洗了两次，提的线粒体挺纯的，结果不错！
  • 李想
    • 单位及专业：山西农业大学
      科室/实验室：环境兽医学
      2025-03-27
    • 使用结果如何：很好用
    • 简述实验条件：将试剂盒中的溶液室温冰上解冻后；按每100mg组织加入1mL预冷的线粒体分离试剂A，将样品悬液转移到预冷的玻璃匀浆器中，在冰浴条件下匀浆。将上步骤中得到的上清4℃，10000g离心20min，所得上清和沉淀分别为胞浆、线粒体粗品。将线粒体沉淀重悬于线粒体蛋白抽提试剂B中，4℃，10000g离心10min，重复3次，所得线粒体沉淀于线粒体蛋白抽提试剂C中溶解。用BCA法测定蛋白浓度后，制样进行免疫印迹检测。
  • 星辰
    • 单位及专业：三峡大学药学
      科室/实验室：糖脂代谢
      2025-03-05
    • 使用结果如何：提出来蛋白浓度低
    • 简述实验条件：用腹脂提取线粒体蛋白，细胞裂解程度确定有主观性，提出蛋白浓度忽高忽低。影响后续wb实验结果。wb实验条带上样后 条带淡
  • blue blue
    • 单位及专业：哈尔滨医科大学流行病与卫生统计学
      科室/实验室：地病中心
      2023-08-05
    • 使用结果如何：成功抽提线粒体蛋白
    • 简述实验条件：全过程4度低温处理，蛋白样品吸取时注意分层。
  • 王磊
    • 单位及专业：中国药科大学
      科室/实验室：中药学院
      2023-06-22
    • 使用结果如何：试剂盒很不错，提取的很干净
    • 简述实验条件：按照试剂盒说明书操作即可，挺方便，还能同时提取胞浆蛋白
  • 帅比
    • 单位及专业：江西农业大学
      科室/实验室：临床兽医学
      2022-11-12
    • 使用结果如何：成功
    • 简述实验条件：按说明书标准化操作
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